热门:【学术前沿】周斌研究组利用谱系示踪技术无缝隙捕捉体内肿瘤转移中的

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乳腺癌是女性群体的最高致癌，严重威胁着女性患者的生命安全。 原发性乳腺癌患者在进行原位肿瘤切除术后进行适当的放疗或化疗，具有良好的预后结果。 但是，乳腺癌细胞由于失去了正常细胞的特征，细胞间的连接变松，容易脱落，进入血液系统或淋巴系统转移，在远端器官如肺、骨、肝脏等器官上形成转移灶，威胁患者的生命。 因为这对乳腺癌转移方法及其机制的研究很重要。

转移的肿瘤细胞是否发生上皮细胞向间质细胞的转化( epithelialmesenchymaltransition，emt )是肿瘤研究行业的一大热点。 同时近年来emt在肿瘤转移过程中的作用存在争议。 在emt过程中，上皮细胞失去了其特有的生物学特征，失去了细胞极性，失去了与基底膜的联系，赋予了一点间充质细胞的特征，细胞形态呈纺锤形，具有比较强的移动和侵袭能力，具有分解凋亡和细胞外基质的能力 前期的研究认为利用体外细胞培养和移植的方法emt过程对肿瘤细胞的转移起着重要的作用，但没有直接的体内实验证据，近年来研究者提出体内肿瘤细胞的转移不需要emt过程。 因此，肿瘤细胞的转移是否会引起上皮细胞向间质细胞的转换，还需要进一步研究。

年7月14日，中国科学院分子细胞科学卓越创新中心周斌研究小组在线复制到developmental cell杂志《geneticfatemappingoftransientcellfaterevealsn-cadherinactive》 该研究成果表明，在乳腺癌转移过程中，肿瘤细胞上皮细胞向间质细胞的转移具有异质性，原位肿瘤细胞在发生依赖ncadherin的emt的同时，依赖ncadherin的emt对肿瘤细胞的贡献形成了大部分肺转移灶，insin

以前传递的基于cre-loxp的同源重组系统示踪技术可以揭示细胞在身体上的命运，但通常是塔莫昔芬诱导时标记的细胞群，同时标记的这些细胞的分子标记通常在细胞内稳定表达，诱导型单相 因为这种同源重组系统不适合追踪肿瘤模型中的瞬时和可逆的emt过程。 在本研究项目中，周斌研究组的科研人员基于双同源重组系统制作了诱导型无间隙光谱系统示踪技术，以自发性乳腺癌肿瘤模型小鼠mmtv-pymt为研究对象，用kit-creer对小鼠乳腺管腔上皮细胞

首先研究者基于前期的双同源重组系统，建立了用于身体捕捉emt的诱导型无间隙遗传光谱系统示踪技术，即emtracer系统。 为了研究乳腺肿瘤细胞转移过程中的emt，研究者研究了kit-creer； emtgene-lsl-dre； nr1( emtracer小鼠，emtgene是一点公认的间质细胞分子标记，如vimentin和n-cadherin与自发性乳腺癌肿瘤模型小鼠mmtv-pymt一起配伍，被他莫昔芬诱导后，KIT-CET kit-creer被重组为报告基因nr1的loxp，在kit+的乳腺管腔上皮细胞中标记绿色荧光蛋白( zsgreen )，可以在光谱上追踪kit+上皮细胞在乳腺稳态维持中的细胞命运(图a ) kit-creer和emtgene-lsl-dre的loxp被重构，位于两个loxp之间的stop序列被切除，当从上皮细胞向间质细胞的转换发生时，emtgene开始表达，emtgene后面的dre表达，并进行了报告 通过切割位于两个rox位点之间的roxloxpstoploxpzsgreenpolyarox序列，开始表达红色荧光蛋白( tdtomato )，使产生emt的细胞变成以前的绿色。 同时，在emtgene-lsl-dre的stop数组被剪切后，dre将持续表达。 emt过程是瞬时的、可逆的，但它使用emtracer鼠标实现emt过程的持续监视，弥补了感应式creer监视emt过程的缺陷。 研究人员收集肿瘤早期和晚期的原位肿瘤和肺组织进行免疫荧光染色，分解肿瘤细胞中的emt状况，通过流动筛选筛选产生n-cadherin依赖的emt的乳腺原位肿瘤细胞，这些细胞高表达间质细胞的分子马 同时，这些n-cadherin依赖emt发生的乳腺原位肿瘤细胞在体外培养中具有更强的侵袭能力。

其次，研究人员利用n-cad flox小鼠在乳腺原位肿瘤细胞中特异性敲除n-cadherin，肺转移灶的形成减少，但vimentin全敲除的乳腺肿瘤小鼠依然能形成肺转移灶(图c )

图a利用了双同源重组酶介导的emt示踪的工作原理。 图b不间断地捕捉着emt这样短暂可逆的细胞命运过程。 图c依赖于n-cadherin，而不是vimentin介导的emt过程。

该研究结果表明，在乳腺癌肿瘤细胞转移过程中，肿瘤细胞的emt具有异质性，同时本研究建立的诱导型无间隙谱系示踪技术也可用于发育或其他肿瘤模型中的emt研究。

据说研究是由博士后李燕、吕赞医生等在周斌研究员的指导下进行的。 这项研究得到了复旦大学施奇惠教授、暨南大学蔡冬青教授、albany大学吴明福教授、上海营养健康所胡国宏研究员、香港中文大学吕爱兰教授、南方医科大学冯景教授及西班牙神经研究所angela nieto教授的大力协助。

聘任

中国科学院上海生化细胞研究所周斌研究小组出于科研快速发展的需要，想招募生物医学或生物新闻方向博士课程后1~2名。 欢迎遗传学技术、干细胞、组织再生者参加，共同拓展新技术、新方向。

课题领袖介绍:

周斌，md，phd，研究员，博士生导师。 2002年7月毕业于浙江大学医学院临床医学系，获得md。 2006年7月毕业于中国医学科学院中国协和医科大学，获得phd。 从2006年到2006年在美国哈佛大学医学部波士顿儿童医院做博士后研究。 年8月开始担任中国科学院上海生命科学研究院研究员，研究组长。 获得过国家优秀青年科学基金、国家万人计划“领军人才”等。

第一研究方向:

1 .开发和优化遗传谱系示踪的新技术，实现哺乳动物体内更准确高效的细胞跟踪和遗传操作。

2 .利用遗传学、分子生物学、细胞生物学、生物新闻学等手段研究干细胞在器官发育和组织再生中的功能及其命运调控机制。

详细消息请访问实验室的主页。

sibcb.ac/pi.asp？ id=168

招聘职位:博士后

职场要求:

1 .作为第一作者在有名的学术期刊上发表过论文

2 .有丰富的实验经验，可以独立工作

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1 .本人的详细学习和简历2 .两位专家的推荐信和联系方法

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邮件的标题中明确记载着“姓名-申请博士后”。

原文链接:

doi/10.1016/j.devcel..06.021

资料来源: bioart

1980-

原标题:《【学术前沿】周斌研究组利用光谱示踪技术无间隙地捕捉体内肿瘤转移中的emt过程》

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来源：重庆新闻